Direkte antiglobulintest

Antiglobulintest, også omtalt som Coombs test, er en ofte anvendt diagnostisk værktøj, der bruges til detektering af immunohematological og immunologiske lidelser. Baseret på teknikken og formål, der er to varianter af antiglobulintests: den direkte antiglobulintest (DAT) / direkte Coombs test (DCT), og den indirekte antiglobulin test (IAT). Det er bydende nødvendigt at nævne, at direkte antiglobulintest anvendes til at påvise en særlig type blodmangel, der er forårsaget af unormal funktion af immunsystemet. Menneskelige krop er udstyret til at producere antistoffer til at identificere og angribe fremmede patogener. Men i nogle tilfælde, immunsystem syntetisere antistoffer, der er rettet mod og dræbe røde blodlegemer (eller RBC i vores krop) for at forårsage hæmolytisk anæmi.

Hvornår skal du bruge til at tage en direkte antiglobulintest?

Når din læge er ikke sikker på, om antistofferne er knyttet til dine RBC, kan direkte antiglobulintest hjælpe i en sådan situation. Almindelige scenarier, hvor din læge kan anbefale direkte antiglobulintest inkluderer: post-transfusion tegn på hæmolytisk anæmi og til tider diagnosticering nyfødte, hvis moderen har udviklet antistoffer mod føtale røde blodlegemer og bestået det videre til barnet under intrauterin liv. Hvis venstre uopdaget, chancerne for at udvikle livstruende tilstande som hæmolytisk sygdom hos nyfødte øges betydeligt.

Hæmolytisk anæmi er normalt på grund af hyperaktivering af immunsystemet, der fører til dannelse af antistoffer mod kroppens eget RBC`er, som også er kendt som autoimmun hæmolytisk anæmi. Og symptomer kan indeholde:

• Åndedrætsbesvær
• Mangel på energi og stigende følelse af træthed
• Mørk farvet urin og gulsot
• Lav RBC tælle på blodprøver
• Kolde ekstremiteter, herunder hænder og fødder
• Heart spørgsmål som hjerte mumlen eller fiasko, og uregelmæssig hjerterytme

Hvordan er den direkte antiglobulintest Performed?

Working Princippet om DAT

Direkte antiglobulintest hjælper med at opdage den vivo antistof coating af røde blodlegemer (antistofferne kunne være IgG eller kompliment eller begge). I blodstrømmen, RBC`er har visse antigener, der tilbyder fastgørelsessteder til antistoffer. Enhver trigger eller reaktion, der kan aktivere disse fastgørelsessteder kan stimulere symptomerne på hæmolytisk anæmi. Dette er grundlaget for HDN (hæmolytisk sygdom hos nyfødte), autoimmun hæmolytisk anæmi og transfusion reaktion. Aktiveringen og coating kan også være forårsaget på grund af visse medikamenter.

I denne test, røde blodlegemer vaskes og derefter inkuberet med humant serum. Denne teknik tillader antistoffer for at få binder til antigenerne på RBC. Fremgangsmåden involverer derefter vask og tilsætning af anti-human globulin. Hvis agglutinering forekommer efter tilsætning af anti-human globulin (undertiden benævnt Coombs reagens), så er det et tegn på antistof belægning over cellerne in vivo. Det er bydende nødvendigt at nævne, der kan detekteres både IgG og IgM-antistoffer ved anvendelse af denne test.

Teknikker til DAT

1. Tage patientens røde blodlegemer fra et EDTA (ethylendiamintetraeddikesyre), som sikrer prøven antikoaguleret.
2. Dispensere en dråbe RBC suspension (2% -5%) separat i hver af de 4 reagensglas, og mærke de 4 rør med tags: Poly, Kontrol, anti-IgG og anti-C3.
3. Vask RBC`erne med saltvand, og derefter vippe røret på hovedet for at dekanteres saltvand. Så rydde bunden af ​​rørene med den venstre saltvand, og gentage dette i 3 til 4 gange. Tør rørene med en absorberende serviet.
4. Tilsæt to dråber polyspecifikke AHG ind i "Poly" rør, og dispensere to dråber 6% BSA til "Kontrollere" rør.
5. Ryst forsigtigt for at kombinere indholdet i rørene, og RBC i hvert rør vil danne en pille eller en knap, som vil blive testet for agglutination. Optag resultaterne.
6. Hvis det polyspecifikke reagenset viser positive resultater, vil specifikke tests med anti-IgG anti-C3-reagenser være nødvendige for at identificere cellen belægning, uanset om det er antistof eller komplement eller begge.
7. Dispensér 2 dråber anti-lgG AHG til "anti-lgG" rør, og 2 dråber anti-C3 AHG til "anti-C3" rør. Ryst at kombinere indholdet.
8. Testen skal være meget følsom, så vi bliver nødt til at inkubere alle negativer i 5 minutter for øget belægning. For at detektere svaghed i overtræk, overholde alle negativer med mikroskop.
9. Hvis rød top rør er blevet brugt til at indsamle prøven, hvorefter falske positive resultater kan komme.

• Når størkning sker eller den er afkølet, er det på grund af svaghed i kolde virkende auto-antistoffer, herunder anti-I, tilstanden finder sted i in vitro komplement.
• Undgå lavendel-top rør til opbinding af calcium- og magnesiumioner.
• Undgå aktivering af komplement in vitro.

10. I tilfælde af positiv DAT, får følgende oplysninger om patienten:

• Diagnosticering af visse sygdomme
• passende medicin
• Historien om transfusion af røde blodlegemer og komponenter i plasma
• Andre tests, der indikerer ødelæggelse i RBC

For mere information om DAT og IAT, se videoen nedenfor:

Sådan fortolkes testresultaterne

Vi ved, at antistoffer tillægger RBC når DAT er positiv. Omfanget af positivitet afhænger af styrken af ​​DAT og samtidig mængden af ​​bundne antistoffer. Men hvis RBC er ødelagt allerede, denne situation ikke altid forholde sig til sværhedsgraden. I direkte antiglobulintest, påvises antistoffer uden at identificere årsagen og typen af ​​hæmolytisk anæmi. For at finde ud af årsagerne bag det, sygehistorie skal overholdes og lægeundersøgelse skal gennemføres, for eksempel historien om transfusion, narkotika reaktion, osv

Det er vigtigt at nævne, at en lille del af befolkningen tester DAT positiv uden at opleve eller manifesterer nogen tegn på hæmolytisk anæmi. Hvis DAT er negativ, antyder det antistoffer ikke er bundet til RBC`er. Derfor kan påvises og undersøges andre årsager.

Nogle situationer, hvor DAT er positiv, er:

• Autoimmun hæmolytisk anæmi (på grund af hyperaktivitet af immunsystemet mod RBC)
• Udvikling af antistoffer på RBC, er betingelsen kaldes "lægemiddeltoksicitet". Det er forårsaget af visse lægemidler, der omfatter cephalosporiner, levopoda, dapson, nitrofurantion, NSAID som ibuprofen
• Når donorblod er angrebet af immunsystemet (som en del af transfusion reaktion)
• De typer af mor og barn blod er forskellige
• Leukæmi herunder kronisk lymfatisk leukæmi
• En autoimmun problem kaldet lupus
• mononukleose
• Syfilis
• Mycoplasma-infektion.

Undertiden resultaterne af direkte antiglobulintest kan være umulig, selv uden nogen sygdom eller risiko. Desuden kan testen afbrudt af nogle lægemidler og nogle kan forårsage resultaterne positive uden at have hæmolytisk anæmi. Nogle lægemidler, der kan forårsage hæmolytisk anæmi er:

• Nogle antibiotika
• Insulin
• Nogle særlige blodtryk medicin

Del på sociale netværk: